Ανάλυση ανοσοπροσροφητικού ενζύμου: αποκωδικοποίηση, μέθοδοι

Με την ανάπτυξη σχετικών επιστημών όπως η γενετική, η μοριακή βιολογία, η χημεία, καθώς και η ανάπτυξη της τεχνολογικής προόδου, η σύγχρονη ιατρική διαθέτει καινοτόμες μεθόδους διάγνωσης μιας ευρείας ποικιλίας ανθρώπινων ασθενειών. Χαρακτηρίζονται από υψηλή ακρίβεια των αποτελεσμάτων και ασφάλεια απόδοσης. Ένας από αυτούς τους τρόπους για τον εντοπισμό προβλημάτων υγείας είναι ο ανοσοπροσροφητικός προσδιορισμός που συνδέεται με ένζυμα. Έχει αποκτήσει ευρεία δημοτικότητα κατά την τελευταία δεκαετία και έχει αποκτήσει τη φήμη του ως μια πολύ αποτελεσματική, αξιόπιστη και φιλική προς τον ασθενή μέθοδο για την ανίχνευση ασθενειών ακόμη και πριν από την εμφάνιση εξωτερικών συμπτωμάτων. Θα εξηγήσουμε εύκολα ποιος είναι αυτός ο τύπος διάγνωσης, ποια είναι η αρχή της δράσης του, σημειώστε τα πλεονεκτήματα, θα προσανατολιστούμε στο κόστος μιας τέτοιας ανάλυσης.

Η απάντηση του οργανισμού στην παθογόνο χλωρίδα

Προκειμένου να καταλάβουμε πώς, χάρη σε μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία, οι τεχνικοί εργαστηρίου διαγιγνώσκουν διάφορες ασθένειες, είναι απαραίτητο να κατανοήσουμε τη φυσιολογική διαδικασία που συμβαίνει στο σώμα κατά τη διάρκεια της μόλυνσης με λοιμώξεις. Όταν ένας παθογόνος μικροοργανισμός εισέρχεται στην κυκλοφορία του αίματος, το ανθρώπινο ανοσοποιητικό σύστημα επιδεικνύει μια προστατευτική αντίδραση με τη μορφή απελευθέρωσης ορισμένων ουσιών - αντισωμάτων. Συνδέονται στο κελί και αναλύουν εάν είναι μέρος του σώματος ή έχει εισβάλει από το εξωτερικό. Εάν το ανοσοποιητικό σύστημα διαπιστώσει ότι το κύτταρο είναι ξένο, τότε ο αριθμός των αντισωμάτων αρχίζει να αυξάνεται για την καταπολέμηση του παθογόνου μικροοργανισμού.

Τα αντισώματα έρχονται σε πολλές μορφές και έχουν τα δικά τους χαρακτηριστικά. Ορισμένες ουσίες εμφανίζονται απευθείας κατά τη διάρκεια της περιόδου μόλυνσης, άλλες παραμένουν καθ 'όλη τη διάρκεια της ζωής στο ανθρώπινο σώμα και χάρη σε αυτές αναπτύσσουν σταθερή ανοσία σε μια συγκεκριμένη ασθένεια. Οι πρωτεϊνικές δομές χωρίζονται στους ακόλουθους τύπους: A, D, E, M, G. Στην ιατρική, τα αντισώματα ονομάζονται ανοσοσφαιρίνες. Επομένως, είναι σύνηθες να προσδιορίζονται οι δείκτες αυτών των ουσιών με λατινικά γράμματα Ig.

Η ενζυμική ανοσοπροσροφητική ανάλυση (ELISA) βασίζεται σε δεδομένα από ιατρικές γνώσεις. Χρησιμοποιώντας ειδικά αντιγόνα στο εργαστήριο, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί η παρουσία ή η απουσία ορισμένων αντισωμάτων σε βιολογικό υλικό. Με βάση τα αποτελέσματα μιας τέτοιας ανάλυσης, ο γιατρός μπορεί να κάνει μια διάγνωση, καθώς και να προσδιορίσει όχι μόνο την παρουσία της παθολογίας, αλλά και τον περιορισμό της προέλευσής της, για να προσδιορίσει το επίπεδο κινδύνου για τον ασθενή. Σε μια ανοσοδοκιμασία ενζύμου, η παρουσία αντισωμάτων των ομάδων Μ και G διερευνάται συχνότερα..

Τι είναι το IFA;?

Πράγματι, μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία δεν αποτελεί καινοτομία στη σύγχρονη κοινωνία. Εφευρέθηκε τη δεκαετία του '80. Αλλά για τη διενέργεια τέτοιων μελετών, απαιτήθηκε ογκώδης ακριβός εξοπλισμός. Επομένως, αυτή η μέθοδος χρησιμοποιήθηκε μόνο σε ειδικά εξοπλισμένα επιστημονικά εργαστήρια: χρησιμοποιήθηκε για την πληκτρολόγηση κυττάρων και ιστών. Αλλά τότε δεν είχε μεγάλη διανομή στη διαγνωστική ιατρική, ήταν τεχνικά δύσκολο και εξαιρετικά ακριβό στη χρήση. Μόνο με την ανάπτυξη της τεχνολογίας και την εφεύρεση υλικών βιοπολυμερών, η ELISA βελτιώθηκε. Μετά από αυτό η μέθοδος άρχισε να διαδίδεται και να κερδίζει εμπιστοσύνη στους ιατρικούς κύκλους.

Όπως αναφέρθηκε παραπάνω, αυτή η μέθοδος περιλαμβάνει την ανίχνευση ορισμένων ομάδων ανοσοσφαιρινών στο βιοϋλικό - αίμα, αμνιακό υγρό, υαλώδες ή εγκεφαλονωτιαίο υγρό.

Υπάρχουν μελέτες χωρίς εφαρμογή αντιγόνου στην επιφάνεια και ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία, η οποία περιλαμβάνει την αντίδραση σε ειδικά φρεάτια. Η τελευταία μέθοδος έχει μεγάλη ευαισθησία και αξιοπιστία, και γι 'αυτό πραγματοποιείται ανάλυση σε ιατρικά εργαστήρια για την ανίχνευση ανθρώπινων ασθενειών.

Ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία

Ανάλογα με την υποτιθέμενη ασθένεια, το απαραίτητο αντιγόνο χρησιμοποιείται από το κιτ ανοσοπροσροφητικής ανάλυσης που συνδέεται με ένζυμο, το οποίο κατά τη διάρκεια της χημικής αντίδρασης παρουσία μόλυνσης θα συνδέεται με την παθογόνο χλωρίδα. Αυτή η διαδικασία ονομάζεται ανοσοαπόκριση..

Στη συνέχεια, προκειμένου να προσδιοριστεί οπτικά το αποτέλεσμα της μελέτης, πραγματοποιήστε την ενζυματική φάση της ELISA. Περιλαμβάνει χρώση του υλικού χρησιμοποιώντας ειδικά αντιδραστήρια. Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιούνται ένζυμα όπως αλκαλική φωσφατάση, υπεροξειδάση και αβιδίνη. Ανάλογα με το χρώμα που λαμβάνεται κατά τη διάρκεια των χημικών αντιδράσεων, προσδιορίζεται το αποτέλεσμα της ανοσοδοκιμασίας του ενζύμου.

Τι είναι η χρωματομετρία;?

Η ανάλυση της ενζυματικής φάσης της διάγνωσης πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας τη μέθοδο, η οποία ονομάζεται "χρωματομετρία". Το γεγονός είναι ότι όχι μόνο το χρώμα του υλικού δίνει πληροφορίες σχετικά με τη μόλυνση, αλλά και την πυκνότητα χρώματος που προκύπτει από χημικές αντιδράσεις. Αυτός ο δείκτης καθορίζει τη συγκέντρωση του παθογόνου μικροοργανισμού. Εάν η μη αυτόματη μέθοδος διαγνωστικών χρησιμοποιείται με παλιό τρόπο, τότε δημιουργείται ένα ειδικό γράφημα βαθμονόμησης για τον προσδιορισμό αυτών των δεικτών.

Στα σύγχρονα εργαστήρια, η χειροκίνητη μέθοδος χρησιμοποιείται σπάνια σήμερα. Για την ανάλυση του ELISA, χρησιμοποιείται μια ειδική συσκευή - ένα χρωματόμετρο, στο οποίο μόνο οι ερευνητικές παράμετροι ρυθμίζονται χειροκίνητα και στη συνέχεια όλες οι εργασίες, συμπεριλαμβανομένης της σχεδίασης, εκτελούνται αυτόματα.

Μέθοδοι ELISA

Υπάρχουν άμεσες και έμμεσες μέθοδοι ενζύμου ανοσοδοκιμασίας. Η πρώτη προβολή διαρκεί λιγότερο χρόνο, καθώς έχει μόνο 3 στάδια εκτέλεσης. Πρώτον, προστίθενται ειδικά αντισώματα στα αντιγόνα του υλικού δοκιμής που τοποθετείται σε ειδικά φρεάτια. Στη συνέχεια, αφαιρέστε την περίσσεια τους και πραγματοποιήστε την ενζυματική φάση της ανάλυσης, λαμβάνοντας έτσι το αποτέλεσμα.

Η έμμεση μέθοδος χρησιμοποιείται πολύ πιο συχνά, καθώς έχει μεγαλύτερη ευαισθησία σε σύγκριση με την άμεση μέθοδο διάγνωσης. Κατά τη διεξαγωγή του, χρησιμοποιείται μια διπλή μελέτη. Δηλαδή, το αντιγόνο συνδέεται πρώτα με ένα μη επισημασμένο αντίσωμα και μετά με ένα επισημασμένο. Αυτή η διαδικασία απαιτεί περισσότερο χρόνο, αλλά το αποτέλεσμα είναι το πιο ακριβές..

Κιτ αντιδραστηρίων

Κιτ ανοσοπροσροφητικής σύνδεσης ενζύμου παράγονται από διαφορετικούς κατασκευαστές σε μεγάλη ποικιλία διαμορφώσεων. Στη Ρωσία, η αναγνωρισμένη εταιρεία είναι η Ένωση Ιατρικών και Βιολογικών. Αυτός ο κατασκευαστής παράγει κιτ αντιδραστηρίων για μελέτες ELISA για όλες σχεδόν τις λοιμώξεις που είναι κοινές στα γεωγραφικά πλάτη μας και μπορούν να αναλυθούν με αυτόν τον τρόπο. Εκτός από τα ίδια τα αντιδραστήρια, πρόσθετα υλικά περιλαμβάνονται στα κιτ, τα οποία εξασφαλίζουν ασφάλεια, ευκολία και ταχύτητα ανάλυσης. Επιπλέον, οι χημικές ουσίες είναι βαμμένες σε διαφορετικά χρώματα, γεγονός που μειώνει την πιθανότητα σφάλματος στην επιλογή του εργαστηρίου αντιδραστηρίου.

Τα χημικά-βιολογικά σύνολα διαφέρουν στη σχετική προσβασιμότητα, η οποία επηρεάζει άμεσα την κατανομή και τη διαθεσιμότητα του ενζυμικού ανοσοπροσδιορισμού για τον πληθυσμό.

Οφέλη διαγνωστικής μεθόδου

Αναμφίβολα, η ενζυμική ανοσοδοκιμασία έχει ορισμένα πλεονεκτήματα σε σύγκριση με άλλες διαγνωστικές μεθόδους:

  1. Χρησιμοποιώντας το, μπορείτε ακόμη και να προσδιορίσετε την ασήμαντη παρουσία παθογόνων οργανισμών, γεγονός που υποδηλώνει υψηλή ευαισθησία του τεστ..
  2. Η ικανότητα ανίχνευσης μιας ασθένειας στα πρώτα στάδια, η οποία αυξάνει σημαντικά την πιθανότητα επιτυχούς θεραπείας.
  3. Απλότητα και ευκολία λήψης βιολογικού υλικού. Μια τέτοια ανάλυση πραγματοποιείται τόσο σε ιδιωτικά εργαστήρια όσο και σε κρατικά εργαστήρια. Εάν είναι απαραίτητο, η νοσοκόμα μπορεί να πάρει το υλικό από τον ασθενή στο σπίτι.
  4. Η ανάλυση απαιτεί πολύ μικρή ποσότητα βιοϋλικών.
  5. Γρήγορο αποτέλεσμα. Ο σύγχρονος ιατρικός εξοπλισμός σας επιτρέπει να κάνετε ανάλυση κατά τη διάρκεια της ημέρας.
  6. Η ικανότητα ανίχνευσης λανθάνουσας ασυμπτωματικής μορφής μόλυνσης.
  7. Προσβασιμότητα στη μελέτη.
  8. Εάν είναι απαραίτητο, είναι δυνατές μαζικές έρευνες που χρησιμοποιούν αυτήν τη μέθοδο..
  9. Είναι δυνατόν να παρακολουθείτε την πρόοδο της νόσου και την αποτελεσματικότητα της συνταγογραφούμενης θεραπείας, καθώς είναι δυνατόν να κάνετε μια ανάλυση ELISA πολλές φορές απολύτως ασφαλή για τον ασθενή.
  10. Αυτοματοποίηση των σταδίων της ανάλυσης, η οποία εξαλείφει τον ανθρώπινο παράγοντα και αυξάνει την αξιοπιστία των αποτελεσμάτων.
  11. Τα αντιδραστήρια για το ELISA αποθηκεύονται για μεγάλο χρονικό διάστημα - περίπου ένα χρόνο.
  12. Η ανάλυση είναι δυνατή με διακυμάνσεις στη θερμοκρασία περιβάλλοντος..

Ανοσοσφαιρίνες ομάδας Μ

Τα αντισώματα της ομάδας Μ παράγονται από το ανοσοποιητικό σύστημα αμέσως μετά την ανίχνευση ενός ξένου αντιγόνου. Επομένως, εάν το ένζυμο ανοσοπροσδιορισμός τελείωσε με την ανίχνευση τέτοιων ουσιών στο βιοϋλικό, τότε αυτό υποδηλώνει ένα οξύ στάδιο της πορείας της νόσου, την πρωτογενή μόλυνση. Οι ανοσοσφαιρίνες της ομάδας Μ μπορούν να βρίσκονται στο σώμα για έως και ένα μήνα, ανάλογα με τον τύπο της λοίμωξης. Τότε ο αριθμός τους μειώνεται σε πλήρη εξαφάνιση.

Ανοσοσφαιρίνες ομάδας Ο

Οι πρωτεϊνικές δομές τύπου G φαίνεται να αντικαθιστούν τις ανοσοσφαιρίνες της ομάδας Μ. Αυτές οι ουσίες παράγουν σταθερή, στις περισσότερες περιπτώσεις, δια βίου ανοσία έναντι της νόσου. Ο προσδιορισμός της πρωτεϊνικής δομής του IgG στο υπό δοκιμή υλικό υποδεικνύει ότι το σώμα είχε προηγουμένως συναντηθεί με ένα παθογόνο και έχει μια προστατευτική αντίδραση από την επαναμόλυνση.

Ενδείξεις για διάγνωση

Χρησιμοποιείται ένας ενζυμικός ανοσοπροσροφητικός προσδιορισμός για τον προσδιορισμό διαφόρων μολυσματικών ασθενειών, ορμονικών καταστάσεων και δοκιμών αλλεργίας. Και συγκεκριμένα:

  • προσδιορίστε το επίπεδο των θυρεοειδικών ορμονών.
  • δείκτες της αναπαραγωγικής ορμονικής ομάδας ·
  • δείκτες όγκου
  • ανίχνευση μολυσματικών παραγόντων, όπως κυτταρομεγαλοϊός, ηπατίτιδα, τοξόπλασμα, ερυθρά, ιλαρά, φυματίωση, χλαμύδια, σύφιλη, μυκόπλασμα, ουρήπλασμα, candida, giardia και ακόμη και HIV.
  • διαγιγνώσκουν αυτοάνοσες ασθένειες. Συμπεριλαμβανομένου του ενζυμικού ανοσοπροσροφητικού προσδιορισμού: TSH, TG, T3 και T4 χρησιμοποιούνται συχνά για τη μελέτη των θυρεοειδικών ορμονών.

Εκτός από διαγνωστικούς σκοπούς, η ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία χρησιμοποιείται σε ιατρικές ερευνητικές δραστηριότητες.

Πώς λαμβάνεται το υλικό?

Στις περισσότερες περιπτώσεις, συνιστάται δειγματοληψία φλεβικού αίματος. Μετά την επεξεργασία και την προετοιμασία του υλικού για τη μελέτη, πραγματοποιείται ανοσοπροσροφητικός προσδιορισμός συνδεδεμένος με ένζυμο για ορό ή πλάσμα αίματος.

Η μελέτη της ορμονικής ομάδας απαιτεί ιδιαίτερη προσοχή, καθώς σε αυτήν την περίπτωση είναι εξαιρετικά σημαντικό να ληφθούν υπόψη τα χαρακτηριστικά της πρόσληψης υλικού. Για παράδειγμα, η διάγνωση των περισσότερων ορμονών στο αναπαραγωγικό σύστημα μιας γυναίκας απαιτεί λήψη φλεβικού αίματος σε ορισμένες ημέρες του εμμηνορροϊκού κύκλου. Ορισμένες άλλες ορμόνες επηρεάζονται από εξωτερικούς παράγοντες: εποχικότητα, ώρα της ημέρας, ψυχολογική κατάσταση του ασθενούς και πολλά άλλα. Χωρίς να λαμβάνονται υπόψη συγκεκριμένοι παράγοντες, μπορεί να έχετε ένα ψευδές αποτέλεσμα, το οποίο θα οδηγήσει σε επιδείνωση της νόσου ή σε ακατάλληλη συνταγογραφούμενη θεραπεία.

Σε ορισμένες, πιο συχνά περίπλοκες περιπτώσεις, μπορεί να χρειαστούν εγκεφαλονωτιαίο υγρό, υαλώδες σώμα ή αμνιακό υγρό εγκύου γυναίκας για ανάλυση. Οι διαδικασίες συλλογής αυτών των βιολογικών υλικών ενέχουν συγκεκριμένο κίνδυνο, έχουν αντενδείξεις και περίοδο ανάκαμψης. Επομένως, μια τέτοια ανοσοπροσροφητική ανάλυση που συνδέεται με ένζυμο πρέπει να πραγματοποιείται μόνο σύμφωνα με τις μαρτυρίες του γιατρού και υπό την επαγγελματική του επίβλεψη. Η αποκρυπτογράφηση σε αυτήν την περίπτωση απαιτεί ειδικές ιατρικές γνώσεις και ενδέχεται να χρειαστεί λίγος χρόνος.

Προετοιμασία ανάλυσης

Πρέπει να διεξαχθεί ανοσοπροσροφητικός προσδιορισμός συνδεδεμένος με ένζυμο, σύμφωνα με όλες τις συστάσεις, καθώς εξωτερικοί παράγοντες επηρεάζουν τα αποτελέσματα της μελέτης. Για παράδειγμα, είναι σημαντικό να δωρίσετε φλεβικό αίμα με άδειο στομάχι το πρωί (έως 11 ώρες). 2 εβδομάδες πριν από την υποτιθέμενη πρόσληψη υλικού, πρέπει να σταματήσετε να παίρνετε φάρμακα, ειδικά ορμόνες. Λίγες μέρες πριν από τη μελέτη, θα πρέπει να απέχετε από την κατανάλωση αλκοόλ και λιπαρών τροφών, καθώς και να αποκλείσετε τη σωματική δραστηριότητα, τις ανησυχίες και τα στρες..

Αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων

Η αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων μίας ενζυμικής ανοσοπροσροφητικής δοκιμασίας απαιτεί ειδικές γνώσεις σχετικά με τα χαρακτηριστικά των πρωτεϊνικών δομών (αντισώματα), τα οποία περιγράφηκαν παραπάνω (IgG και IgM). Σύμφωνα με αυτά τα δεδομένα, αναλύονται ερευνητικοί δείκτες. Ο πίνακας περιγράφει τις επιλογές που μπορούν να ληφθούν κατά την ανάλυση:

Ενζυμική ανοσοδοκιμασία: ένα αντίγραφο
Ανοσοσφαιρίνες ΜΑνοσοσφαιρίνες GΥποτιθέμενη αποκρυπτογράφηση
αρνητικάαρνητικάΟ οργανισμός δεν έχει βιώσει ποτέ αυτή τη μόλυνση. Δεν υπάρχει παθογόνο, ούτε αντισώματα σε αυτό.
αρνητικάθετικώςΟ οργανισμός έχει αναπτύξει ισχυρή ανοσία στη μόλυνση..
θετικώςαρνητικάΟξεία μορφή μόλυνσης.
θετικώςθετικώςΠιθανότατα η πρωτογενής λοίμωξη, αλλά απαιτούνται πρόσθετες διαγνωστικές εξετάσεις.

Αναλύοντας τον πίνακα που παρουσιάζεται, μπορούμε να συμπεράνουμε ότι στις περισσότερες περιπτώσεις, θα απαιτηθούν πρόσθετες μελέτες για την επιβεβαίωση της διάγνωσης. Η ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία από μόνη της δεν μπορεί να δώσει μια σαφή απάντηση. Ο κανόνας σε αυτήν την περίπτωση δεν έχει σαφή όρια: οι ανιχνευόμενες πρωτεΐνες της ομάδας G δείχνουν μόνο ότι το σώμα είχε προηγουμένως μολυνθεί με καθορισμένο παθογόνο. Αλλά το ίδιο αποτέλεσμα μπορεί να δείχνει την παρουσία οξείας φάσης - είναι σημαντικό να συγκρίνουμε πολλούς παράγοντες και δείκτες για να κάνουμε τη σωστή διάγνωση.

Παράγοντες κινδύνου

Το ELISA είναι 90% ακριβές. Ωστόσο, υπάρχουν παράγοντες κινδύνου που επηρεάζουν τη διαστρέβλωση του διαγνωστικού αποτελέσματος: δυσλειτουργία του εξοπλισμού, ακατάλληλη συλλογή υλικού, αποθήκευση και μεταφορά, μη συνεκτίμηση άλλων εξωτερικών παραγόντων.

Δεν συνιστάται η διάγνωση μετά από μετάγγιση αίματος, αιμόλυση, χειρουργική επέμβαση, βιοψία ή διάτρηση βιολογικού υλικού - αυτό μπορεί επίσης να επηρεάσει τα αποτελέσματα των δεικτών.

Κόστος ανάλυσης

Το κόστος μιας διαγνωστικής μελέτης έχει ένα ευρύ φάσμα και εξαρτάται από τον τύπο της ανάλυσης και το αντιγόνο που θα καθοριστεί, δεδομένου ότι με βάση αυτούς τους παράγοντες, υπολογίζεται το κόστος των κιτ αντιδραστηρίων και προσδιορίζεται η πολυπλοκότητα της ανάλυσης. Ωστόσο, στις περισσότερες περιπτώσεις, η ανοσοπροσροφητική ανάλυση που σχετίζεται με ένζυμο είναι διαθέσιμη σε πολλούς ασθενείς. Η τιμή του είναι από 300 r. έως 2000 r.

Το ELISA είναι μια προσιτή, γρήγορη και πολύ αποτελεσματική μέθοδος για τη διάγνωση ενός μεγάλου καταλόγου ασθενειών. Αλλά μόνο ένας εξειδικευμένος ιατρός έχει δικαίωμα να αποκρυπτογραφήσει τα αποτελέσματα και να κάνει μια διάγνωση.

Ενζυμική ανοσοπροσδιορισμός με ανάλυση των δεικτών

Ανοσοποιητικές και ενζυματικές αντιδράσεις

Όπως υποδηλώνει το όνομα, μια εξέταση αίματος IFA περιλαμβάνει διάφορα συστατικά, δηλαδή μια ανοσοποιητική και ενζυματική αντίδραση.
Μια ανοσολογική αντίδραση σάς επιτρέπει να δεσμεύσετε κυτταρικά στοιχεία και παθογόνα και μια ενζυματική σας επιτρέπει να οπτικοποιήσετε και να αξιολογήσετε το αποτέλεσμα μιας προηγούμενης αντίδρασης.

Εξετάστε κάθε αντίδραση με περισσότερες λεπτομέρειες..

Τι είναι οι ανοσολογικές αντιδράσεις;?

Το ανοσοποιητικό είναι συγκεκριμένες αντιδράσεις που σας επιτρέπουν να συνδέσετε ένα αντιγόνο με ένα αντίσωμα και να δημιουργήσετε ένα ανοσοσύμπλεγμα. Τι σημαίνει αυτό? Πρώτα απ 'όλα, είναι απαραίτητο να κατανοήσουμε ότι οποιαδήποτε κυτταρική επιφάνεια περιέχει μόρια που περιέχουν δεδομένα σχετικά με το κύτταρο, που ονομάζονται αντιγόνα και χωρίζονται σε:

Τα μεμονωμένα αντιγόνα, παρά ορισμένες ομοιότητες, έχουν πολλές διαφορές. Είναι παρόντες σε έναν συγκεκριμένο οργανισμό και δεν επαναλαμβάνονται ποτέ σε άλλους. Τα αντιγόνα ειδών μπορούν να βρεθούν στους οργανισμούς διαφόρων τύπων ζωντανών πλασμάτων. Έτσι, για παράδειγμα, οι πίθηκοι, τα άλογα ή τα σκυλιά έχουν τα δικά τους, σε αντίθεση με οποιοδήποτε αντιγόνο. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο τα αντιγόνα αυτού του τύπου χρησιμοποιούνται από το ανοσοποιητικό σύστημα για να αναγνωρίσουν τα δικά τους και ξένα κύτταρα, τα οποία, στην πραγματικότητα, αποτελούν τη βάση του ενζύμου ανοσοδοκιμασίας.

Πώς αναγνωρίζονται τα αντιγόνα; Όλα είναι αρκετά ξεκάθαρα εδώ. Με απλά λόγια, ένα κύτταρο που είναι άνοσο αιχμαλωτίζει το κύτταρο που το προκάλεσε να «υποψιαστεί» και συγκρίνει το αντιγόνο του με την περιγραφή κατά νου. Εάν το αντιγόνο του αμφίβολου κυττάρου αντιστοιχεί σε αυτό, τότε το ανοσοκυτταρικό "απελευθερώνει" και συνεχίζεται. Εάν η περιγραφή είναι διαφορετική, τότε η απάντηση του οργανισμού στην απειλή είναι η ίδια - καταστροφή. Επιπλέον, η αναγνώριση του «εχθρού» σε αυτήν την περίπτωση είναι σχεδόν 100%.

Ανοσοδοκιμασία τύπου σάντουιτς

Σύκο. 2. Σχηματική αναπαράσταση του τύπου «σάντουιτς» ανοσοπροσδιορισμού. Το ATP είναι ένα αντίσωμα ενός υποστρώματος, το ATd είναι ένα αντίσωμα ανίχνευσης, το AG είναι ένα αντιγόνο, το Μ είναι μια ετικέτα ομοιοπολικώς συνδεδεμένη με ένα αντίσωμα ανίχνευσης, το P είναι ένα υπόστρωμα στο οποίο το αντίσωμα του υποστρώματος απορροφάται.

Σε αυτήν την παραλλαγή ανοσοδοκιμασίας (Εικ. 2), χρησιμοποιείται ένα ζεύγος αντισωμάτων ειδικά για χωρικά απομακρυσμένους επιτόπους του αντιγόνου που μελετήθηκε..

Ι. Προσρόφηση αντισωμάτων υποστρώματος

Στα φρεάτια μιας πλάκας ανοσοδοκιμασίας 96 φρεατίων, τα αντισώματα υποστρώματος απορροφούνται 1-2 μg ανά φρεάτιο σε 100 μl αλατούχου διαλύματος φωσφορικών (PBS). Η επώαση πραγματοποιείται για 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου και ανακίνηση σε οριζόντιο αναδευτήρα δισκίου. Το πλύσιμο (2 φορές) των μη δεσμευμένων αντιγόνων μορίων πραγματοποιείται με αλατούχο διάλυμα ρυθμισμένο με φωσφορικά που περιέχει 0,1% Tween-20 (PBST).

ΙΙ. Κλειδαριά

Για τον αποκλεισμό μη ειδικών θέσεων σύνδεσης, τα φρεάτια πλακών γεμίζονται με PBST και επωάζονται για 10-15 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου.

III. Επωάσεις αντιγόνου

50 μl του διαλύματος δοκιμής ή τυπικές αραιώσεις αντιγόνου προστίθενται στα φρεάτια με προ-απορροφημένα αντισώματα. Οι αραιώσεις αντιγόνου πρέπει να παρασκευάζονται με βάση το PBST, καθώς το Tween-20 μειώνει τη μη ειδική σύνδεση μορίων πρωτεΐνης μεταξύ τους και στην επιφάνεια του δισκίου. Τόσο το δοκιμαστικό διάλυμα όσο και οι τυπικές αραιώσεις του αντιγόνου εισάγονται σε ζεύγη (ή 3 επαναλήψεις), χρησιμοποιώντας δύο (τρία) φρεάτια για κάθε αραίωση πρωτεΐνης. Η επώαση πραγματοποιείται σε θερμοκρασία δωματίου για 30 λεπτά με συνεχή ανάδευση. Το πλύσιμο πραγματοποιείται με διάλυμα PBST 3 φορές.

IV. Επώαση με αντίσωμα με ένζυμο

100 μl διαλύματος ειδικών αντισωμάτων συζευγμένων με ενζυμική ετικέτα προστίθενται στα φρεάτια της πλάκας. Η βέλτιστη συγκέντρωση συζευγμένων αντισωμάτων υποδεικνύεται συνήθως από τον κατασκευαστή (συνήθως χρησιμοποιείται συγκέντρωση 2-4 μg / ml). Η επώαση με αντισώματα που περιέχουν την ενζυμική σήμανση πραγματοποιείται για 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου και ανακινείται σε οριζόντιο αναδευτήρα πλακών. Το πλύσιμο πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας PBST 5-6 φορές.

V. Διεξαγωγή ενζυματικής αντίδρασης συνοδευόμενη από την εμφάνιση ενός έγχρωμου προϊόντος

100 μl διαλύματος υποστρώματος προστίθενται στα φρεάτια και επωάζονται για 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου με συνεχή ανάδευση..

VI. Διακόψτε την ενζυματική αντίδραση

Πριν από τη μέτρηση της οπτικής πυκνότητας, μια αντίδραση χρώματος διακόπτεται χρησιμοποιώντας 0,5 Μ H2ΕΤΣΙ4. Μετά την επώαση, 50 μl διαλύματος θειικού οξέος 0,5 Μ προστίθενται σε φρεάτια με διάλυμα εργασίας RPD. Μετά από αυτό, μπορείτε αμέσως να αρχίσετε να μετράτε την οπτική πυκνότητα.

VII. Μέτρηση απορρόφησης

Η οπτική πυκνότητα του διαλύματος του χρωματισμένου προϊόντος μετράται σε λ = 490 nm χρησιμοποιώντας φασματοφωτόμετρο δισκίου.

έντυπη έκδοση

Περισσότερα για τις ανοσοσφαιρίνες

Συνολικά, το ανθρώπινο σώμα παράγει 5 γνωστές τάξεις αντισωμάτων, οι οποίες ονομάζονται Ig (που αντιπροσωπεύουν ανοσοσφαιρίνες), οι οποίες ανήκουν στις κατηγορίες Α, Μ, Γ, Ε και Δ. Όλα αυτά έχουν μεγάλη σημασία για την ερμηνεία των αποτελεσμάτων της ELISA. Φυσικά, υπάρχουν πολύ περισσότερα συγκροτήματα, και πολύ μακριά είναι όλα ανοιχτά. Αλλά στη διάγνωση διαφόρων ασθενειών, οι πρώτοι τρεις τύποι αντισωμάτων είναι πολύτιμοι. Μια εξέταση αίματος ELISA χρησιμοποιεί το μέγιστο των πληροφοριών: τη στιγμή που εμφανίζονται τα αντισώματα στο αίμα, η αλλαγή στη συγκέντρωσή τους ανάλογα με το χρόνο, την περίοδο εξαφάνισης και τον τύπο συγκεκριμένων αντισωμάτων.

Έτσι, οι συμμετέχοντες στην πρωτογενή, οξεία μολυσματική διαδικασία είναι οι ανοσοσφαιρίνες κατηγορίας Μ, οι οποίες υποδηλώνουν πάντα μια οξεία φάση, ακόμη και όταν η ασθένεια διαγράφεται κλινικά. Ένα τυπικό παράδειγμα είναι η anicteric μορφή της οξείας ιογενούς ηπατίτιδας Β ή Γ. Μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία για ηπατίτιδα θα δείξει ότι ένα άτομο έχει οξεία ηπατίτιδα και συμπτώματα όπως πόνος στο υποχόνδριο, ξηροστομία, πόνοι στις αρθρώσεις και άλλα μη ειδικά συμπτώματα είναι εύκολα κατανοητά.

Μετά από αρκετές εβδομάδες, αυτά τα αντισώματα βρίσκονται σε μια ολοένα και περισσότερο εξαφανιζόμενη συγκέντρωση, αποδίδοντας ανοσοσφαιρίνες κατηγορίας G. Ανιχνεύονται στο αίμα για μήνες, ακόμη και χρόνια, και υποδηλώνουν ανάκαμψη, και στη συνέχεια μπορούν να παραμείνουν δια βίου, σχηματίζοντας ισχυρή ανοσία. Αυτό δείχνει μια ισχυρή άμυνα ενάντια στα παθογόνα αντιγόνα. Έτσι, είναι τα αντισώματα αυτής της τάξης που κάνουν ένα άτομο άνοσο σε επαναλαμβανόμενα κρούσματα άνθρακα και πανώλης. Αλλά υπάρχουν φορές που αυτά τα αντισώματα δεν παρεμβαίνουν στις επιβλαβείς επιδράσεις των αντιγόνων. Σε αυτήν την περίπτωση, μπορούμε να μιλήσουμε για την αύξηση της δραστηριότητας της χρόνιας διαδικασίας.

Όσον αφορά την IgE, έχει εφαρμογές στη διάγνωση διαφόρων παρασιτικών προσβολών και αλλεργικών καταστάσεων και η IgD έχει μια βοηθητική λειτουργία: η ανοσοπροσροφητική δοκιμασία που σχετίζεται με ένζυμο επιτρέπει τη χρήση της στην ολοκληρωμένη διάγνωση του βρογχικού άσθματος και των αυτοάνοσων καταστάσεων. Φυσικά, η αποκρυπτογράφηση της ανάλυσης ELISA είναι πολύ πιο περίπλοκη και οι ειδικοί στην ανοσολογία μπορούν να πουν πολλά περισσότερα. Ποιες είναι οι ενδείξεις ότι ο ασθενής μπορεί ανεξάρτητα να πάει στο εργαστήριο για να πραγματοποιήσει μελέτες?

Πώς αναλύει η ELISA

Στις συνθήκες των εξοπλισμένων εργαστηρίων και των ιατρικών κέντρων, ο προσδιορισμός του τρύπων από το ένζυμο ανοσοδοκιμασία μπορεί να πραγματοποιηθεί με διάφορες μεθόδους, οι οποίες ονομάζονται άμεσες και έμμεσες. Ωστόσο, η βάση αυτών των αντιδράσεων είναι ένας τρόπος που σας επιτρέπει να αναλύσετε τη σύφιλη από την ELISA. Αυτή η δοκιμή πραγματοποιείται με συγκεκριμένο τρόπο..

Ο γιατρός του εργαστηρίου έχει ένα ειδικό δισκίο - ένα πάνελ με τρύπες με τη μορφή στρογγυλών εσοχών σε ποσότητα έως και εκατό. Επίσης, ειδικά παρασκευασμένα συμπυκνωμένα αντιγόνα για σύφιλη χρησιμοποιούνται σε κιτ για αυτήν την ανάλυση, τα οποία τοποθετούνται στα φρεάτια της πλάκας ELISA. Μετά τη λήψη του αίματος του ασθενούς το πρωί με άδειο στομάχι, ο ορός διαχωρίζεται από το αίμα και τοποθετείται σε φρεάτια με αντιγόνα. Η αντίδραση σύνδεσης αντιγόνου-αντισώματος λαμβάνει χώρα στα φρεάτια.

Η ELISA για τη σύφιλη βασίζεται στην αντίδραση της δέσμευσης των πρώτων σταδίων ανοσολογικών ενώσεων και συζεύξεων με μια ειδική ενζυμική ετικέτα, η οποία είναι απαραίτητη για την ανάγνωση της ποιότητας της αντίδρασης. Σε αυτό το στάδιο, εκτός από την ενζυματική υπεροξειδάση, οι χρωμογόνοι χρωστικοί παράγοντες εισάγονται για τη χρώση του υλικού ανάλογα με το αποτέλεσμα της αντίδρασης.

Με βάση τις εμφανιζόμενες χρωματιστές τρύπες στο tablet, η δοκιμή αποκρυπτογραφείται. Σε σύνολα διαφορετικών μεθόδων ELISA, επισυνάπτονται πίνακες χρωμάτων, οι οποίοι καθορίζουν την ποσότητα, το επίπεδο των ανοσοσφαιρινών, τα αντισώματα από τον ορό του ασθενούς σε 1 μονάδα όγκου.

Επίσης, για την αξιολόγηση του αποτελέσματος της αντίδρασης, χρησιμοποιείται ειδικός εξοπλισμός - φασματοφωτόμετρο για φωτομετρία και εκτίμηση της πυκνότητας του υλικού στα φρεάτια σε σύγκριση με δείγματα ελέγχου. Με βάση την πυκνότητα, επιτυγχάνεται ένα αποτέλεσμα που καθορίζεται σαφώς για κάθε αιτιολογικό παράγοντα της σύφιλης εντός των ορίων των προτύπων και της παθολογίας.

γενικές πληροφορίες

Ένα ένζυμο ανοσοδοκιμασία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό του επιπέδου των ορμονών, των ανοσοσφαιρινών, των ανοσολογικών συμπλοκών, καθώς και ενός αριθμού βιολογικά δραστικών ουσιών. Ως υλικό για μια τέτοια μελέτη, μπορείτε να δωρίσετε αίμα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, το περιεχόμενο του υαλοειδούς σώματος κ.λπ..

Μια ανοσοπροσροφητική δοκιμασία που συνδέεται με ένζυμο χρησιμοποιήθηκε πρόσφατα όλο και περισσότερο λόγω ορισμένων πλεονεκτημάτων:

  • ευαισθησία πάνω από 90 τοις εκατό?
  • σταθερή αποθήκευση των συστατικών που απαιτούνται για τη συγκράτηση ·
  • γρήγορη και εύκολη διάγνωση.
  • ελάχιστο κόστος υλικών ·
  • αυτοματοποιημένη διαδικασία
  • χαμηλό κόστος.

Επιπλέον, ένα ELISA μπορεί να ανιχνεύσει λοιμώξεις, συμπεριλαμβανομένης της ηπατίτιδας, σε πρώιμο στάδιο. Αυτός είναι ο λόγος που μερικές φορές συνιστάται αντί για μελέτες PCR, καθώς και κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Ωστόσο, δεν συμβαίνει χωρίς μειονεκτήματα. Τα αποτελέσματα τέτοιων δοκιμών θα μιλήσουν μόνο για την απόκριση του σώματος στο παθογόνο, αλλά δεν θα καθοριστεί. Στις περισσότερες περιπτώσεις, συνιστάται συνδυασμός ELISA και PCR..

Με τη βοήθεια των δοκιμών ELISA, μπορείτε να μάθετε τα αποτελέσματα ενός ολόκληρου σετ. Ειδικότερα, θα καθοριστεί ο κανόνας των ορμονών του θυρεοειδούς, η παρουσία δεικτών όγκου και ένας αριθμός λοιμώξεων. Ο κανόνας επιλέγεται ξεχωριστά για κάθε δείκτη. Έτσι, για ενήλικες, η ELISA πρέπει κανονικά να εμφανίζει τιμές TG εντός 70 IU / ml, T4 στην περιοχή από 64 έως 146 nmol / L, το T3 υπολογίζεται στην ποσότητα 1,8-2,8 nmol / L.

Κατά τον προγραμματισμό μιας εγκυμοσύνης, τέτοιες δοκιμές μπορούν να γίνουν για τον προσδιορισμό των ορμονών του φύλου. Συγκεκριμένα, το λουτεϊνοποίηση. Οι τιμές του ποικίλλουν ανάλογα με την ημέρα του κύκλου. Συγκεκριμένα, η μέγιστη τιμή που μπορεί να παρατηρηθεί είναι 150 και η ελάχιστη τιμή 1 mU / L.

Όταν το ELISA χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της σεξουαλικής ορμόνης στους άνδρες, ένας αριθμός που κυμαίνεται από 0,5 έως 10 mU / L θα είναι ένας φυσιολογικός δείκτης. Εάν διερευνηθεί η χρόνια γοναδοτροπίνη, τότε τα αποτελέσματα θα διαφέρουν ανάλογα με το φύλο. Ειδικότερα, για ενήλικες άνδρες και γυναίκες απουσία εγκυμοσύνης, ο δείκτης πρέπει να είναι εντός 5 mU / ml. Εάν η εξέταση πραγματοποιείται κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, τα αποτελέσματα μπορεί να είναι διαφορετικά, ανάλογα με το τρίμηνο, έως και δεκάδες χιλιάδες μονάδες.

Τι είναι τα χλαμύδια

Το PCR, όπως το ELISA, χρησιμοποιείται ευρέως σε σύγχρονα εργαστήρια για τη διάγνωση σεξουαλικά μεταδιδόμενων ασθενειών. Ταυτόχρονα, οι γιατροί συχνά προτείνουν τη διεξαγωγή και των δύο εξετάσεων. Πολλοί ασθενείς πιστεύουν ότι αυτό είναι ένα επιπλέον τράβηγμα χρημάτων, αλλά αυτές οι εξετάσεις έχουν μια σοβαρή διαφορά, αν και με την πρώτη ματιά μπορεί να φαίνονται πανομοιότυπες. Ωστόσο, μια ταξινόμηση των μεθόδων ψυχολογικής έρευνας μπορεί να εφαρμοστεί σε κάποιο βαθμό.

Τα αποτελέσματα των PCR και ELISA χρησιμοποιούνται συχνά κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, όταν είναι απαραίτητο να αποκλειστεί η μόλυνση από χλαμύδια. Συχνά, ένα τόσο θετικό αποτέλεσμα για τη μόλυνση είναι μια απάντηση στο ερώτημα ανδρών και γυναικών, "Γιατί δεν μπορεί να μείνει έγκυος." Εκτός από τον κίνδυνο στειρότητας, τα χλαμύδια κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης ενέχουν κίνδυνο μόλυνσης στο μωρό.

Το κύριο πρόβλημα για τη διάγνωση μιας τέτοιας μόλυνσης είναι η ασυμπτωματική πορεία. Ωστόσο, συγκεκριμένα αντισώματα μπορούν να ανιχνευθούν δέκα ημέρες μετά τη μόλυνση. Εάν ένα τεστ PCR κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης καταδεικνύει την παρουσία ή την απουσία τέτοιων παθογόνων, τότε η ELISA θα σας πει σε ποιο στάδιο είναι η διαδικασία τώρα

Μια τέτοια μελέτη είναι επίσης σημαντική για την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της θεραπείας.

Αποκρυπτογράφηση ανάλυσης

Η ανάλυση της ηπατίτιδας ή οποιουδήποτε άλλου παθογόνου παράγοντα στην απόδοση της ELISA δημιουργεί συχνά ερωτήματα. Συγκεκριμένα, πώς γίνεται η αποκρυπτογράφηση. Προς το παρόν, τα αποτελέσματα δείχνουν μία από τις πέντε ανοσοσφαιρίνες: IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. Αυτοί είναι αυτοί που ξεχωρίζουν, αφού ο ρόλος των άλλων δεν έχει διευκρινιστεί στο τέλος. Το πιο σημαντικό για τη μελέτη είναι οι τάξεις Α, Μ και Γ.

Η ανοσοσφαιρίνη Α είναι κυρίως υπεύθυνη για τις προστατευτικές λειτουργίες των βλεννογόνων. Το αποτέλεσμα της παρουσίας τους θα είναι αρνητικό εάν η ασθένεια εντοπιστεί στην οξεία της μορφή στην αρχή. Η εμφάνιση τέτοιων προστατευτικών δεικτών εμφανίζεται συνήθως δύο εβδομάδες μετά την έναρξη της νόσου. Μερικές φορές ένα θετικό αποτέλεσμα επιτυγχάνεται ακόμη και αργότερα.

Η κύρια λειτουργία αυτών των αντισωμάτων είναι η ανίχνευση και καταστροφή μικροοργανισμών. Ο αριθμός τους μειώνεται πάντοτε εάν η ασθένεια υποχωρήσει. Συνήθως, μετά από οκτώ εβδομάδες από την έναρξη της νόσου, ένα θετικό αποτέλεσμα θα απουσιάζει και πάλι. Η ανίχνευση ανοσοσφαιρινών κατηγορίας Α σε μεταγενέστερη ημερομηνία μπορεί να υποδηλώνει μια διαδικασία που ρέει σε χρόνια.

Οι κύριοι δείκτες, η αποκωδικοποίηση των οποίων βοηθά στον προσδιορισμό της οξείας φάσης της παθολογίας, είναι ανοσοσφαιρίνες που ανήκουν στην κατηγορία M. Μπορείτε να τις εντοπίσετε στο αίμα πέντε ημέρες μετά τη μόλυνση. Καθυστέρησαν στο αίμα για περίπου έξι εβδομάδες, μετά την οποία η εξαφάνισή τους γίνεται γρήγορα.

Οι ανοσοσφαιρίνες κατηγορίας G είναι υπεύθυνες για το σχηματισμό υπολειμματικού ανοσοποιητικού αποτελέσματος. Περίπου ένα μήνα μετά τη μόλυνση, αρχίζουν να ανιχνεύονται στο αίμα. Στο μέλλον, ο ορισμός τους επεκτείνεται για πολλούς μήνες. Συχνά μπορείτε να τα παρατηρήσετε όλη σας τη ζωή. Τέτοιες ανοσοσφαιρίνες σχηματίζονται ως προστατευτική αντίδραση, η οποία εξαλείφει την εκ νέου μόλυνση. Για παράδειγμα, τέτοιες ανοσοσφαιρίνες σχηματίζονται στο αίμα ενός ατόμου που είχε ανεμοβλογιά στην παιδική ηλικία και, κατά συνέπεια, έλαβε ανοσία μέχρι το τέλος της ζωής. Φυσικά, υπάρχουν και άλλες λοιμώξεις, η επιστροφή των οποίων είναι δυνατή. Σε αυτήν την περίπτωση, η ανάλυση θα ανιχνεύσει την επανεμφάνιση αυτής της ομάδας ανοσοσφαιρινών.

Οι ανοσοσφαιρίνες Ε χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση παρασίτων στο σώμα. Η ανοσοσφαιρίνη που ανήκει στην ομάδα D βρίσκεται στα Β-λεμφοκύτταρα και υπάρχει σε ορισμένες ποσότητες σε υγιείς ανθρώπους. Σε ηλικία περίπου δέκα ετών, φτάνουν τις μέγιστες τιμές τους. Η ποσότητα αυτής της ανοσοσφαιρίνης αυξάνεται κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Επιπλέον, η παρουσία του σε μεγαλύτερη από τη συνηθισμένη ποσότητα μπορεί να αποτελεί ένδειξη βρογχικού άσθματος, μια κατάσταση ανοσοανεπάρκειας.

Αποκρυπτογράφηση

Τα αντισώματα, είναι επίσης ανοσοσφαιρίνες, χωρίζονται σε πέντε κατηγορίες, αλλά συνήθως μόνο τρεις από αυτές προσδιορίζονται: M, G και A, που συσσωρεύονται στο σώμα σε διαφορετικές περιόδους μετά τη μόλυνση.

Οι ανοσοσφαιρίνες Μ εμφανίζονται πρώτα, είναι IgM. Εμφανίζονται από 4-5 ημέρες μετά τη μόλυνση και βρίσκονται στο αίμα για ενάμιση μήνα, μετά την οποία εξαφανίζονται. Εάν η ELISA δείχνει την παρουσία τους, αντιμετωπίζουμε μια οξεία περίοδο της νόσου ή την επιδείνωσή της.

Σε τρεις έως τέσσερις εβδομάδες, εμφανίζεται IgG, δηλαδή ανοσοσφαιρίνες κατηγορίας G. Μπορούν να υπάρχουν για αρκετούς μήνες ή ακόμη και χρόνια στη σειρά. Εάν η ELISA πραγματοποιήθηκε δύο φορές με διάστημα δύο εβδομάδων και η ποσότητα IgG και στα δύο δείγματα αυξήθηκε, μπορούμε να μιλήσουμε για λοίμωξη ή επανεμφάνιση με αυτό.

Η IgA, δηλαδή, αντισώματα κατηγορίας Α ανιχνεύονται μετά από επιδείνωση της λοίμωξης ή ένα μήνα μετά την εμφάνισή της στο σώμα. Τα περισσότερα από αυτά κυκλοφορούν στους βλεννογόνους μας και μόνο το ένα πέμπτο στο αίμα. Εξαφανίζονται μόνο μετά την καταστροφή όλων των μολυσματικών παραγόντων, δηλαδή τουλάχιστον δύο εβδομάδες μετά τη μόλυνση, το πολύ οκτώ.

Εάν, μετά τη θεραπεία, η ανάλυση του ELISA δείχνει την παρουσία τους, η ασθένεια έχει περάσει στο χρόνιο στάδιο.

Όταν πραγματοποιείται αποκρυπτογράφηση, πρέπει επίσης να προσέξετε τα σημάδια + και - στη φόρμα. Μόνο ένας γιατρός μπορεί να αποφανθεί πλήρως, αλλά ορισμένα χαρακτηριστικά του σώματος μπορούν να κριθούν βάσει των ακόλουθων δεδομένων:

Μόνο ένας γιατρός μπορεί να αποφανθεί πλήρως, αλλά ορισμένα χαρακτηριστικά του σώματος μπορούν να κριθούν βάσει των ακόλουθων δεδομένων:

  • Η έλλειψη ανοσίας στις λοιμώξεις υποδεικνύεται από έναν τέτοιο συνδυασμό δεικτών όπως JgM, JgG, JgA με ένα μείον παντού.
  • Η παρουσία ανοσίας μετά από εμβόλιο ή λοίμωξη υποδεικνύεται από τα JgM και JgA με το σύμβολο μείον και το JgG με το σύμβολο συν (JgG (+)).
  • Οι ακόλουθοι δείκτες μπορούν να πουν για την παρουσία οξείας λοίμωξης: JgA (- / +), JgG (- / +) και JgM (+);
  • Σε περίπτωση επιδείνωσης χρόνιων λοιμώξεων, η φόρμα θα περιέχει την ακόλουθη σημείωση: JgM, JgG και JgA με πλεονεκτήματα παντού.
  • Σε χρόνιες λοιμώξεις, παρατηρείται η ακόλουθη εικόνα: JgG (+/-), JgM (-) και JgA (+/-).
  • Το JgM (-) υποδηλώνει ανάκτηση.

Συχνά διεξάγεται επίσης μια μελέτη, όπως μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική ανάλυση ορού αίματος. Απαιτείται για τη μελέτη των θυρεοειδικών ορμονών. Οι δείκτες τέτοιων ορμονών όπως η θυροξίνη, η ελεύθερη θυροξίνη, η τριιωδοθυρονίνη, η ελεύθερη τριιωδοθυρονίνη και η θυροσφαιρίνη είναι σημαντικοί εδώ.

Επιπλέον, μια τέτοια μελέτη είναι χρήσιμη για τη διάγνωση μολυσματικών και αυτοάνοσων ασθενειών..

Τι είναι ένα ένζυμο ανοσοδοκιμασία?

Με την πρόοδο της σύγχρονης ιατρικής, είναι δυνατόν να πραγματοποιηθεί μια πιο εις βάθος διάγνωση σε περίπτωση υποψίας ορισμένων παθολογιών στον ασθενή. Μία από τις ενημερωτικές μεθόδους εργαστηριακής έρευνας ήταν η ELISA, η οποία πραγματοποιείται με τη μέθοδο δειγματοληψίας φλεβικού αίματος. Δηλαδή, για τον ασθενή, τίποτα δεν αλλάζει συνολικά. Αλλά ο αναλυτής ELISA διεξάγει μια εξελιγμένη τεχνική για τη μελέτη του συλλεγέντος βιοϋλικού. Σε ποιες είναι οι αναλύσεις ELISA και ποιες είναι οι λεπτές αποχρώσεις της χρήσης της μεθόδου ELISA ως διαγνωστικού, κατανοούμε το παρακάτω υλικό.

Τι είναι ένα ένζυμο ανοσοδοκιμασία?

Μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία είναι μία από τις μεθόδους εργαστηριακής διάγνωσης, η οποία βασίζεται αποκλειστικά σε μια αντίδραση που ονομάζεται «αντιγόνο-αντίσωμα». Αξίζει να καταλάβουμε ότι ένα αντιγόνο είναι μια ξένη πρωτεϊνική ένωση (μόριο) που έχει εισέλθει στο ανθρώπινο σώμα με μια παρασιτική, ιογενή ή άλλη μόλυνση. Δηλαδή, απλά ένα παράσιτο. Με τη σειρά του, ένα αντίσωμα είναι ένα ανοσοκύτταρο (ανοσοσφαιρίνη) που υπερασπίζεται το ανθρώπινο σώμα όταν ανιχνεύονται ξένα μόρια σε αυτό.

Τα ίδια τα αντισώματα προκαλούνται από τα ίδια τα αντιγόνα που έχουν διεισδύσει στο ανθρώπινο σώμα. Όταν εισέρχονται στη «μάχη» για την υγεία του σώματος, τα αντισώματα φαίνεται να επισημαίνουν τα αντιγόνα, κάτι που βλέπει ένας τεχνικός εργαστηρίου κατά την εξέταση αίματος. Δηλαδή, στο συλλεχθέν βιοϋλικό, μπορείτε να παρακολουθείτε όχι μόνο την παρουσία μόλυνσης, αλλά και τα ίχνη της μετά την πλήρη ανάρρωση του σώματος.

Κατά τη διεξαγωγή ELISA, ο βοηθός του εργαστηρίου μπορεί να δει τις ακόλουθες ανοσοσφαιρίνες για αντιγόνα:

  • Ανοσοσφαιρίνες Μ (εμφανίζονται στα αποτελέσματα ως IgM). Μαρτυρούν ότι η μολυσματική διαδικασία στο σώμα κερδίζει μόνο τη δύναμή της. Δηλαδή, η μόλυνση εμφανίστηκε πρόσφατα.
  • Ανοσοσφαιρίνες G (εμφανίζονται ως IgG). Συμβάλλουν στην καταστροφή αντιγόνων λίγες μέρες μετά την εισαγωγή μόλυνσης στο ανθρώπινο σώμα. Οι ανοσοσφαιρίνες G μπορούν να βρίσκονται στο σώμα του ασθενούς για μεγάλο χρονικό διάστημα, δημιουργώντας ανοσία σε έναν συγκεκριμένο ιό.
  • Ανοσοσφαιρίνες Ε (εμφανίζονται ως IgE). Αναφέρετε παρασιτικές λοιμώξεις στο σώμα. Μιλά επίσης για ατοπικές αντιδράσεις στις αλλεργίες. Αξίζει να γνωρίζουμε ότι η ανάλυση του ELISA δίνει ένα αποτέλεσμα με ακρίβεια 90% για παρασιτικές λοιμώξεις.
  • Ανοσοσφαιρίνες Α (εμφανίζονται ως IgA). Προστατεύστε τους βλεννογόνους του ασθενούς όσο το δυνατόν περισσότερο.

Έτσι, με τη συνταγογράφηση ενός ενζυμικού ανοσοπροσροφητικού προσδιορισμού για έναν ασθενή, ο θεράπων ιατρός μπορεί να παρακολουθεί τη διάρκεια της λοίμωξης, τον βαθμό εξέλιξής της ή να ανιχνεύει την παρουσία ανοσίας σε μια συγκεκριμένη λοίμωξη.

Η διαδικασία διάγνωσης ELISA μοιάζει με αυτήν:

  • Το συλλεχθέν φλεβικό αίμα φέρεται στην κατάσταση του ορού αίματος στο εργαστήριο.
  • Στη συνέχεια, ο βοηθός εργαστηρίου χρησιμοποιεί έναν ειδικό δίσκο με κελιά, σε καθένα από τα οποία υπάρχουν ήδη όλα τα απαραίτητα αντιγόνα. Αρκεί να ρίχνουμε απλώς ορό αίματος σε κάθε κύτταρο και να παρακολουθούμε την αντίδραση ανοσοσφαιρινών (αντισώματα) στα αντιγόνα. Η παρουσία της «επιθυμητής» αντίδρασης αποδεικνύεται από μια αλλαγή στο χρώμα του υλικού δοκιμής. Στη συνέχεια, ο βοηθός εργαστηρίου μελετά την οπτική πυκνότητα του μέσου δοκιμής.

Γενικά, μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική ανάλυση για παράσιτα βοηθά στον εντοπισμό τέτοιων παρασιτικών παθολογιών:

  • Ασκαρίδωση και εντεροβίαση (σκουλήκια και σκουλήκια)
  • Τριχίνιαση;
  • Οπιστορίαση σε οξείες και χρόνιες μορφές.
  • Giardiasis;
  • Amoebiasis;
  • Τοξοπλάσμωση;
  • Λεϊσμανίαση σε οποιαδήποτε μορφή.

Σημαντικό: η ενζυμική ανοσοδοκιμασία είναι τόσο ποιοτική όσο και ποσοτική. Στην πρώτη περίπτωση, ο βοηθός εργαστηρίου επιβεβαιώνει ή αρνείται την παρουσία της επιθυμητής ουσίας στο αίμα. Στη δεύτερη περίπτωση, η ανάλυση δείχνει τη συγκέντρωσή της στο σώμα του ασθενούς.

Μειονεκτήματα της μεθόδου

Με όλα τα πλεονεκτήματα αυτής της μεθόδου διάγνωσης, αξίζει να καταλάβουμε ότι μια ανοσοπροσροφητική δοκιμασία που σχετίζεται με ένζυμο δεν είναι τρόπος εύρεσης της αιτίας της ασθένειας ενός ασθενούς, αλλά μόνο μια μέθοδο επιβεβαίωσης της διάγνωσης που υποτίθεται από τον θεράποντα ιατρό. Και δεδομένου ότι η έρευνα είναι αρκετά ακριβή, πρέπει να χρησιμοποιείται με σύνεση. Σε αυτήν την περίπτωση, τα αποτελέσματα της μελέτης πρέπει να ερμηνεύονται μόνο από εξειδικευμένο ειδικό.

Προετοιμασία για ανάλυση παρασίτων

Είναι σημαντικό να κατανοήσουμε ότι ο προσδιορισμός των παρασίτων μέσω μιας εξέτασης αίματος απαιτεί κάποια προετοιμασία από τον ασθενή. Έτσι, πριν από τη δωρεά αίματος, πρέπει να κάνετε τα εξής:

  • Την ημέρα πριν από τη λήψη του βιοϋλικού, τα λιπαρά τρόφιμα, το αλκοόλ και τα καπνιστά τρόφιμα πρέπει να εξαιρούνται από τη διατροφή.
  • Αίμα για ανοσοπροσροφητικό προσδιορισμό που σχετίζεται με ένζυμο για παράσιτα και άλλες λοιμώξεις πρέπει να χορηγείται το πρωί με άδειο στομάχι.
  • Πριν δωρίσετε αίμα, το κάπνισμα απαγορεύεται για τουλάχιστον 3-4 ώρες.
  • Την ημέρα της δειγματοληψίας αίματος, συνιστάται να μην είστε νευρικοί και να μην καταφεύγετε σε αυξημένη σωματική δραστηριότητα.

Η συμμόρφωση με αυτούς τους κανόνες θα βοηθήσει στην αποφυγή ψευδών θετικών αποτελεσμάτων για αντισώματα έναντι παρασίτων..

Αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων

Αφού αποσυναρμολογήσαμε τη συντομογραφία ELISA και τι είναι ─ ανακαλύψαμε ότι αξίζει να πάμε στην ερμηνεία των αποτελεσμάτων. Είναι σημαντικό να καταλάβουμε εδώ ότι εάν η ανάλυση πραγματοποιήθηκε ποιοτικά, το αποτέλεσμα θα είναι μόνο θετικό ή αρνητικό. Δηλαδή, η διάγνωση είτε επιβεβαιώνει τις υποψίες του γιατρού σχετικά με μια συγκεκριμένη διάγνωση, είτε τις αμφισβητεί. Σε αυτήν την περίπτωση, οι χαρακτήρες θα είναι "+" ή "-", αντίστοιχα.

Σημαντικό: ένα αρνητικό αποτέλεσμα της δοκιμής δεν δείχνει πάντα την απουσία λοίμωξης. Το γεγονός είναι ότι αντισώματα κατά των αντιγόνων μπορούν να σχηματιστούν εντός 14 ημερών μετά τη μόλυνση και είναι πιθανό ότι δεν έχουν ακόμη σχηματιστεί.

Εάν διενεργηθεί ποσοτική ανάλυση, τότε προσδιορίζεται ο τύπος των αντισωμάτων, η ποσότητα και το στάδιο της δραστηριότητάς τους. Συγκεκριμένα, με μια τέτοια διάγνωση, προσδιορίζονται αντισώματα IgG και IgM (ανοσοσφαιρίνες), τα οποία σχηματίζονται σε διαφορετικές περιόδους προόδου της μόλυνσης. Τα πιο συνηθισμένα αποτελέσματα σε αυτήν την περίπτωση είναι:

  • Αυξημένη IgM και πλήρης απουσία IgG. Αυτή η εικόνα δείχνει μια πρόσφατη λοίμωξη και μια οξεία φάση της παθολογίας..
  • Αυξημένη δραστικότητα και των δύο τύπων ανοσοσφαιρινών (IgM και IgG). Μιλά για τη μακρά και χρόνια πορεία της μολυσματικής διαδικασίας.
  • Δραστηριότητα IgG και πλήρης απουσία IgM. Η μόλυνση ήταν τουλάχιστον έξι μήνες πριν και τώρα ο ιός βρίσκεται σε παρατεταμένο χρόνιο στάδιο.
  • Η απουσία αντισωμάτων IgG και IgA. Το αποτέλεσμα δεν είναι καθορισμένο..
  • Η απουσία αντισωμάτων IgM, IgA και IgG. Υποδεικνύει έλλειψη ανοσίας σε μια συγκεκριμένη λοίμωξη..
  • Η δραστικότητα των αντισωμάτων IgG, IgM και IgA δείχνει μια επιδείνωση της χρόνιας διαδικασίας.

Εκτός από τον προσδιορισμό των τύπων αντισωμάτων, ο βοηθός του εργαστηρίου σε μια ειδική στήλη της φόρμας δείχνει επίσης τον αριθμό τους στον όγκο του αίματος. Θυμηθείτε, έχοντας καταλάβει ποια είναι η μέθοδος ELISA, μην ερμηνεύετε μόνοι σας τα αποτελέσματα. Τα αποτελέσματα μπορούν να ερμηνευθούν με ακρίβεια μόνο από τον θεράποντα ιατρό, ανάλογα με την προτεινόμενη διάγνωση, με βάση την κλινική εικόνα του ασθενούς..

Περιγραφή της διάγνωσης των ΣΜΝ: ενζυμική ανοσοδοκιμασία (ELISA)

Ο κατάλογος των διαθέσιμων διαγνωστικών μεθόδων επεκτάθηκε ραγδαία τις τελευταίες δεκαετίες, οι διαγνωστικοί προσπαθούν να συνδυάσουν τα πλεονεκτήματα όλων των προηγούμενων αναλύσεων σε νέες μεθόδους, απαλλάσσοντας όλες τις προηγούμενες ελλείψεις τους.

Πρόσφατα, πιο συχνά στη λίστα των διαγνωστικών διαδικασιών εμφανίζεται ανοσοπροσροφητικός προσδιορισμός που σχετίζεται με ένζυμο - μια σύγχρονη και αρκετά νέα δοκιμή, για την οποία λίγα είναι γνωστά σε ένα συνηθισμένο άτομο που δεν σχετίζεται με την ιατρική. Ωστόσο, αυτή η τεχνική επεκτείνει γρήγορα τις τάξεις των υποστηρικτών της μεταξύ εξειδικευμένου ιατρικού προσωπικού. Τι είναι και σε ποιες περιπτώσεις πρέπει να χρησιμοποιείται, μπορείτε να το καταλάβετε εξοικειωμένοι με τα χαρακτηριστικά και τα κύρια χαρακτηριστικά του.

Η ουσία της μεθόδου

Μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική ανάλυση είναι μια οργανική και εργαστηριακή τεχνική που βασίζεται στην αντίδραση μοριακού αντιγόνου-αντισώματος, η οποία καθιστά δυνατή την ανίχνευση συγκεκριμένων πρωτεϊνών σε βιολογικά υλικά (δείγματα για έρευνα). Τέτοιες πρωτεΐνες μπορεί να είναι ένζυμα, ποικιλία μικροοργανισμών (ιοί, βακτήρια, μύκητες), πρωτόζωα κ.λπ..

Μετά την ανακάλυψη της μεθόδου, του δόθηκε το όνομα ELISA test, το οποίο δεν σχετίζεται με το όνομα των ερευνητών, αλλά αποτελεί συντομογραφία του πλήρους ονόματος στην αγγλική έκδοση - προσδιορισμός ανοσοπροσροφητικού που σχετίζεται με ένζυμο. Οι γιατροί σε όλο τον κόσμο χρησιμοποιούν αυτό το όνομα, ορισμένοι γιατροί σε ρωσόφωνες χώρες αποκαλούν επίσης αυτόν τον τύπο έρευνας.

Η κύρια αρχή της μεθόδου είναι η μοριακή αντίδραση αντιγόνου-αντισώματος.

Ένα αντιγόνο είναι οποιοδήποτε ξένο μόριο που εισέρχεται στο ανθρώπινο σώμα ως μέρος ενός μικροβιακό παράγοντα της νόσου. Τα αντιγόνα είναι συνήθως μόρια πρωτεΐνης. Εκτός από τους μικροοργανισμούς, αυτός ο «ξένος» μπορεί να είναι κύτταρα ξένου αίματος που δεν συμπίπτουν σε ομάδα ή παράγοντα Rh.

Σε απόκριση στην είσοδο ενός τέτοιου αντιγόνου, μια ανοσολογική αντίδραση ξεκινά στο σώμα, το οποίο στοχεύει στην προστασία από τυχόν ξένα μόρια. Αυτό συμβαίνει λόγω της σύνθεσης ειδικών παραγόντων του ανοσοποιητικού συστήματος - αντισωμάτων (ανοσοσφαιρίνες). Κάθε αντίσωμα είναι κατάλληλο μόνο για ένα συγκεκριμένο αντιγόνο και εξουδετερώνει τον παθογόνο "εξωγήινο" επικοινωνώντας με αυτό σε ένα μόνο σύμπλοκο. Είναι η διαδικασία μιας τέτοιας δέσμευσης που ονομάζεται αντίδραση αντιγόνου-αντισώματος.

Τύποι αντισωμάτων

Όλα τα αντισώματα (ανοσοσφαιρίνες) χωρίζονται σε 5 τύπους, ανάλογα με το στάδιο της ανοσοαπόκρισης που εμφανίζονται:

  • Κατηγορία M (IgM). Μια αύξηση αυτών των ανοσοσφαιρινών παρατηρείται μέσα στις πρώτες ημέρες μετά την εισαγωγή μιας λοίμωξης ή άλλου παθογόνου παράγοντα. Μετά από περίπου 6 εβδομάδες, αρχίζουν να διαλύονται και να εξαφανίζονται..
  • Κατηγορία G (IgG). Συντίθενται στο δεύτερο στάδιο για να ξεπεραστεί η ασθένεια. Μετά την πλήρη εξάλειψη ξένων μορίων, συνεχίζουν να βρίσκονται στο αίμα σε μικρή ποσότητα για να παρέχουν ανοσία σε περίπτωση επανεμφάνισης.
  • Κατηγορία Α (IgA). Τέτοιες ανοσοσφαιρίνες είναι υπεύθυνες για τις προστατευτικές λειτουργίες των βλεννογόνων μεμβρανών του σώματος, μέσω των οποίων τα παθογόνα στοιχεία διεισδύονται πιο εύκολα, καθώς το βλεννογόνο επιθήλιο είναι πολύ λεπτότερο και πιο τρυφερό από τα συνηθισμένα δερματικά στοιχεία..
  • Κατηγορία E (IgE). Αυτές οι συγκεκριμένες σφαιρίνες κατευθύνουν τη δράση τους κατά των παρασιτικών λοιμώξεων που επηρεάζουν το ανθρώπινο σώμα. Εμφανίζονται ανεξάρτητα από το ποιο όργανο επηρεάζεται από τα παράσιτα..
  • Κατηγορία Δ (IgD). Αυτή η τάξη βρίσκεται πάντα ακόμη και σε υγιείς ανθρώπους. Σε παιδιά ηλικίας κάτω των 10 ετών, σταδιακά αυξάνεται, μετά την οποία η ποσότητα του, που υπόκειται σε απόλυτη υγεία, δεν αλλάζει. Εάν ο δείκτης αυξηθεί πάνω από το φυσιολογικό, τότε αυτό μπορεί να υποδηλώνει εγκυμοσύνη, άσθμα, ανοσοανεπάρκεια κ.λπ..

Για την ELISA, τα πιο σημαντικά επίπεδα ανοσοσφαιρινών IgG, IgM και IgA. Με τις πιστώσεις του μπορείτε να μάθετε αν ένα άτομο είχε μια ασθένεια πριν ή έχει προσβληθεί πρόσφατα, έχει αναπτύξει ασυλία ή αν το σώμα του είναι ανυπεράσπιστο από την παθολογία.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα του ενζυμικού ανοσοπροσδιορισμού

Προς το παρόν, η ELISA είναι μια από τις πιο ακριβείς και ευαίσθητες μεθόδους. Έχει υιοθετηθεί από ειδικούς σε διάφορους τομείς της ιατρικής και συνεχίζει να επεκτείνει το πεδίο εφαρμογής του..

Πλεονεκτήματα μεθόδου

  • Υψηλή ακρίβεια δεδομένων.
  • Ευαισθησία (σας επιτρέπει να εντοπίσετε την απαραίτητη ουσία ακόμη και με ελάχιστη παρουσία του παθογόνου στο δείγμα).
  • Η πιθανότητα διάγνωσης στις πρώτες μέρες της νόσου ή στην περίοδο επώασης.
  • Η ταχύτητα της απόκτησης δεδομένων σε σύγκριση με άλλες μεθόδους παρόμοιας ακρίβειας.
  • Υψηλή αυτοματοποίηση της διαδικασίας και ελάχιστη ανθρώπινη συμμετοχή, η οποία μειώνει την ακρίβεια του ερμηνευτή.
  • Λήψη δεδομένων σχετικά με το στάδιο της παθολογικής διαδικασίας και την αποτελεσματικότητα της επιλεγμένης θεραπείας.
  • Ανώδυνη και χαμηλή επεμβατικότητα κατά την επιλογή υλικού.

Μειονεκτήματα της μεθόδου

  • Στις περισσότερες περιπτώσεις, σας επιτρέπει να προσδιορίσετε την απόκριση του σώματος σε έναν παθογόνο παράγοντα και όχι το ίδιο το παθογόνο.
  • Πριν από τη μελέτη, η φερόμενη ασθένεια πρέπει να είναι γνωστή ακριβώς, καθώς το τεστ είναι πολύ συγκεκριμένο..
  • Η πιθανότητα ψευδών δεικτών που προκαλούνται από τεχνικά ζητήματα, η λήψη φαρμάκων, η ταυτόχρονη παρουσία αρκετών χρόνιων ασθενειών ή μεταβολικών διαταραχών στο σώμα του ασθενούς.
  • Η ερμηνεία των αποτελεσμάτων πρέπει να γίνεται μόνο από εξειδικευμένο ειδικό, καθώς για την ερμηνεία των ληφθέντων δεδομένων είναι απαραίτητη η ειδική εκπαίδευση και ένα μεγάλο απόθεμα ιατρικών γνώσεων σε μια συγκεκριμένη περιοχή.
  • Η ELISA είναι μια μάλλον σπάνια ανάλυση, επομένως, δεν πραγματοποιείται σε όλα τα διαγνωστικά εργαστήρια..
  • Η μέθοδος είναι αρκετά ακριβή, καθώς εκτός από τα αντιδραστήρια, το εργαστήριο πρέπει να διαθέτει ακριβό πολυάριθμο εξοπλισμό και δείγματα αντιγόνων που παράγονται σε ειδικά ινστιτούτα..

Σε ποιες περιπτώσεις χρησιμοποιείτε ενζυμικό ανοσοπροσδιορισμό

Ο πλήρης κατάλογος των ενδείξεων για το διορισμό ενός ενζύμου ανοσοπροσδιορισμού είναι πολύ ευρύς, περιλαμβάνει σχεδόν όλους τους κλάδους της ιατρικής.

Τις περισσότερες φορές, το IFA χρησιμοποιείται για τέτοιους σκοπούς:

  • ανίχνευση μολυσματικών ασθενειών ·
  • διάγνωση σεξουαλικά μεταδιδόμενων νόσων ·
  • προσδιορισμός της ανοσοποιητικής κατάστασης ή μεμονωμένων αυτοάνοσων ασθενειών ·
  • ταυτοποίηση των δεικτών όγκου ·
  • προσδιορισμός ορμονών.

Στην περίπτωση μολυσματικών και ιογενών ασθενειών, η τεχνική επιτρέπει τον εντοπισμό των ακόλουθων παθολογιών:

  • όλους τους τύπους της ιογενούς ηπατίτιδας.
  • Ιός Epstein-Barr;
  • όλες οι μολύνσεις TORCH
  • όλους τους τύπους εντερικών λοιμώξεων.
  • HIV
  • σύφιλη;
  • οι περισσότερες παρασιτικές λοιμώξεις
  • Helicobacteriosis, κ.λπ..

Επιπλέον, το ELISA σας επιτρέπει να προσδιορίσετε γρήγορα και αποτελεσματικά μια καρδιακή προσβολή, να αξιολογήσετε το αναπαραγωγικό δυναμικό του σώματος, να εντοπίσετε αλλεργίες, την πηγή του κ.λπ..

Μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία χρησιμοποιείται για τη διεξαγωγή κλινικών δοκιμών κατά την ανάπτυξη νέων φαρμάκων και για την αξιολόγηση της επίδρασής τους στο ανθρώπινο σώμα.

Τύποι δειγμάτων και μέθοδοι για την επιλογή τους για έρευνα

Τις περισσότερες φορές, το μελετημένο υλικό για ενζυμικό ανοσοπροσροφητικό προσδιορισμό είναι το αίμα, το οποίο λαμβάνεται από τη φλέβα των ασθενών. Η δειγματοληψία πραγματοποιείται με άδειο στομάχι, κυρίως το πρωί. Μετά την επιλογή από το αίμα, αυτά τα διαμορφωμένα κύτταρα που παρεμβαίνουν στη μελέτη διαχωρίζονται και απομακρύνονται, αφήνοντας μόνο τον ορό.

Κατά τη διάγνωση ουρογεννητικών λοιμώξεων, συχνά επιχρίσματα από τους βλεννογόνους ιστούς των γεννητικών οργάνων, βλέννα από την ουρήθρα ή τον τράχηλο, δείγματα από το ορθό, θραύσματα από διάβρωση ή έλκη στη βουβωνική χώρα και άλλα μέρη του σώματος γίνονται το υλικό. Τα επιχρίσματα μπορούν να ληφθούν από την στοματική κοιλότητα, καθώς και από τον ρινοφάρυγγα.

Μερικές φορές ένας ενζυμικός ανοσοπροσδιορισμός χρησιμοποιείται στη μαιευτική και γυναικολογική πρακτική κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης για τον προσδιορισμό της κατάστασης του αμνιακού υγρού. Σε αυτήν την περίπτωση, το αμνιακό υγρό γίνεται δείγμα. Για αυτό, λαμβάνεται μια μικρή ποσότητα υγρού, διαπερνώντας την ουροδόχο κύστη με μια μακριά βελόνα. Όλοι οι χειρισμοί εκτελούνται με ένα αποστειρωμένο όργανο για την ελαχιστοποίηση πιθανών κινδύνων..

Συχνά το υλικό γίνεται εγκεφαλονωτιαίο ή ορώδες υγρό. Αυτό συμβαίνει με τοπική αναισθησία, η οποία εγχέεται..

Διευκρινίστε τι είδους υλικά είναι απαραίτητα για την ανάλυση ανοσοπροσροφητικού που συνδέεται με ένζυμα, εάν ένας ειδικός διευθύνει τη μελέτη. Συχνά, λαμβάνονται διάφοροι τύποι δειγμάτων ταυτόχρονα ή από διαφορετικά μέρη. Ένας γιατρός που εκδίδει παραπομπή για αυτόν τον τύπο εξέτασης θα πρέπει επίσης να ενημερώσει τον ασθενή σχετικά με την προετοιμασία για την παράδοση βιοϋλικών.

Προετοιμασία για ενζυμικό ανοσοπροσδιορισμό

Για να αυξηθεί η ακρίβεια των δεδομένων που λαμβάνονται μετά από μια ανοσοδοκιμασία ενζύμου, η προετοιμασία για την επιλογή υλικού πρέπει να έχει ως εξής:

  • 10 ημέρες πριν από τη μελέτη, εξαιρέστε αντιβιοτικά, αντιιικά και αντιμυκητιασικά φάρμακα.
  • ανά ημέρα, είναι απαραίτητο να αποκλειστεί το αλκοόλ, το κάπνισμα και η λήψη ναρκωτικών ουσιών.
  • κατά την ίδια περίοδο, είναι απαραίτητο να αποφευχθεί η φυσική υπερβολική πίεση.
  • να προειδοποιήσει τον ειδικό συνταγογράφησης για όλα τα φάρμακα που παίρνει ο ασθενής.
  • ειδοποιήστε έναν γιατρό σε περίπτωση εγκυμοσύνης ή ύποπτης εγκυμοσύνης.

Το καλύτερο αν τα υλικά δοκιμής επιλέγονται με άδειο στομάχι το πρωί..

Εάν η διάγνωση στοχεύει στον προσδιορισμό της κατάστασης του ορμονικού υποβάθρου, είναι σημαντικό να εξασφαλιστεί μια ήρεμη κατάσταση την παραμονή και να αποφευχθεί η νευρική ένταση. Για τις γυναίκες, η αιμοδοσία για ορμόνες καθορίζεται σαφώς από την περίοδο του μηνιαίου κύκλου, όπως θα είπε ο γιατρός κατά τη στιγμή του ραντεβού.

2-3 ημέρες πριν από την επιλογή του υλικού, είναι απαραίτητο να εξαιρέσετε τηγανητά και λιπαρά από το μενού και πριν από την ανάλυση για ηπατίτιδα, μην τρώτε εσπεριδοειδή και άλλα φρούτα και λαχανικά σε πορτοκαλί και κίτρινο.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων του ενζύμου ανοσοδοκιμασίας

Το αποτέλεσμα μιας ποιοτικής μελέτης συνήθως υποδεικνύεται από τα σημάδια "+" (βρέθηκαν) ή "-" (δεν βρέθηκαν).

Η παρουσία ή απουσία ορισμένων ομάδων ανοσοσφαιρινών μπορεί να εξαγάγει τα ακόλουθα συμπεράσματα:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - το ανοσοποιητικό σύστημα της νόσου απουσιάζει εντελώς (το σώμα δεν είχε συναντήσει προηγουμένως αυτόν τον τύπο αντιγόνου).
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - προηγουμένως υπήρχε σύγκρουση με αυτό το αντιγόνο ή το εμβόλιο.
  • JgM (+), JgG (- / +), JgA (- / +) - μια οξεία παθολογική διαδικασία (πιθανότατα πρωτογενής).
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - η διαδικασία της χρόνιας πορείας.
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - υποτροπή;
  • JgM (-) - στάδιο ανάκαμψης.

Οι ποσοτικές τιμές φέρουν μεγάλο φορτίο πληροφοριών, αλλά μόνο ο θεράπων ιατρός μπορεί να τις ερμηνεύσει, βάσει προηγούμενων ενδείξεων, ηλικίας ασθενούς και κανόνων για κάθε συγκεκριμένη ασθένεια. Για αυτόν τον λόγο δεν μπορείτε να αξιολογήσετε μόνοι σας τα αποτελέσματα..

Πόσο καιρό να περιμένω αποτελέσματα

Αυτή η τεχνική έχει πολλές ποικιλίες, ανάλογα με το ποια είναι η χρονική περίοδος για τη λήψη δεδομένων στο χέρι. Η μέση διάρκεια της διάγνωσης ELISA είναι 4-6 ώρες, κάτι που σας επιτρέπει να δώσετε αποτελέσματα την επόμενη μέρα.

Οι μακρύτερες μέθοδοι διαρκούν έως και 10 ημέρες, για παράδειγμα, σε περίπτωση μόλυνσης από HIV.

Σε περίπτωση επείγουσας ανάγκης, είναι δυνατή η χρήση ρητών μεθόδων στις οποίες λαμβάνεται απάντηση μετά από 1-2 ώρες.

Πού μπορώ να κάνω μια δοκιμή IFA;

Δεδομένου ότι ο εξοπλισμός για τη διεξαγωγή αυτού του τύπου διάγνωσης είναι αρκετά ακριβός, δεν μπορούν να το αγοράσουν όλα τα εργαστήρια. Επιπλέον, οι δοκιμές που περιέχουν συγκεκριμένα αντιγόνα έχουν περιορισμένη διάρκεια ζωής (συνήθως περίπου 1 έτος), επομένως χρειάζονται συνεχή ενημέρωση..

Για αυτούς τους λόγους, υπάρχουν πολλά από τα εργαστήρια IFA σε κρατικά ιατρικά ιδρύματα. Τις περισσότερες φορές, πρέπει να επικοινωνήσετε με μεγάλα ιδιωτικά ιατρικά ή μεγάλα διαγνωστικά κέντρα.

Για τη διεξαγωγή μελέτης IFA, το εργαστήριο πρέπει να διαθέτει ειδική άδεια και το προσωπικό και οι βοηθοί εργαστηρίου πρέπει να υποβάλλονται σε ειδική εκπαίδευση.

Τις περισσότερες φορές, συνιστάται ένα ειδικό διαγνωστικό κέντρο ή εργαστήριο από τον γιατρό που παραπέμπει τον ασθενή για εξέταση.

Ανοσοπροσδιορισμός ενζύμου

Η τιμή αυτής της μελέτης εξαρτάται από την περιοχή της χώρας και από το επίπεδο της κλινικής που παρέχει την υπηρεσία. Στη Μόσχα, η ελάχιστη τιμή για τον προσδιορισμό ενός αντιγόνου ξεκινά από 700 ρούβλια. Εάν είναι απαραίτητο να προσδιοριστούν ταυτόχρονα πολλές ανοσοσφαιρίνες, η τιμή θα συνοψιστεί.

Σε περίπτωση επείγουσας ανάλυσης, το κόστος αυξάνεται κατά 150-200 ρούβλια. για κάθε αντιγόνο.

Παρά το σχετικά υψηλό κόστος, μια ανάλυση ανοσοπροσροφητικού που συνδέεται με ένζυμα σάς επιτρέπει να κάνετε την εξέταση του ασθενούς όσο το δυνατόν πιο ενημερωτική και ταχύτερη, γεγονός που μειώνει το χρόνο πριν από τη θεραπεία και σας επιτρέπει να σταθεροποιήσετε γρήγορα την κατάσταση ενός ατόμου.

Αυτό το βίντεο παρουσιάζει την ταινία "Βασικές αρχές ανοσοπροσροφητικής ανάλυσης που συνδέονται με ένζυμα".

Είναι Σημαντικό Να Γνωρίζετε Δυστονία

Σχετικά Με Εμάς

Τα ερυθρά αιμοσφαίρια, η δομή και οι λειτουργίες των οποίων θα εξετάσουμε στο άρθρο μας, είναι το πιο σημαντικό συστατικό του αίματος.